Какие катионы в дробном методе анализа определяется в виде дитизонатов? Напишите химизм реакций и укажите условия, которые делают их селективными.
Дробный метод основан на применении реакций, с помощью которых в любой последовательности можно обнаружить искомые ионы в отдельных небольших порциях исследуемого раствора. Пользуясь дробным методом, отпадает необходимость выделения исследуемых ионов из растворов. Для обнаружения соответствующих ионов дробным методом необходимо применять специфические реактивы, позволяющие обнаружить искомый ион в присутствии посторонних ионов. Однако не всегда можно подобрать специфические реакции для обнаружения искомых ионов. В этих случаях в дробном анализе пользуются специальным приемом (маскировкой), с помощью которого устраняется влияние мешающих ионов. При маскировке мешающие ионы переводят в соединения или в другие ионы, которые теряют способность реагировать с реактивами на искомые ионы.
Для идентификации и количественного определения катионов металлов в химико-токсикологическом анализе используются реакции образования внутрикомплексных соединений. Одним из реактивов, широко используемым в этих целях является дитизон. В виде дитизонатов определяются ионы ртути, свинца, цинка, серебра и таллия.
Образование дитизоната Ag:

Далее хлороформный слой отделяют от водного и взбалтывают его с соляной кислотой HCl, дитизонат серебра разрушается, выделяется хлорид серебра AgCl и золотистая окраска переходит в зеленую. Дитизонат ртути в этих условиях не разлагается.

Образование дитизоната Tl:

слой хлороформа красного цвета

Таллий относится к элементам, имеющим переменную валентность, для перевода Tl 3+ в Tl1+ к минерализату добавляют гидроксиламин.
Для маскировки ионов иcпользуют лимонную кислоту, тиомочевину и цианид калия.
При незначительных количествах таллия может не наступить изменение окраски хлороформного слоя. Поэтому независимо от окраски хлороформного слоя его отделяют от водного и в другой делительной воронке его промывают равными количествами раствора аммиака и 1%-ного раствора цианида калия. При наличии ионов таллия хлороформный слой окашивается в розовый или красный цвет. Сурьма такой реакции не дает.

Образование дитизоната Zn:
Реакция является предварительной. Если хлороформный слой не приобретает характерную окраску, дальнейшее ислледование не проводят.
Для маскировки мешающих ионов используют тиосульфат натрия или тиомочевину.

слой хлороформа пурпурно- красного цвета

Образование дитизоната Hg:

слой хлороформа желтого или желто-оранжевого цвета
Для маскировки мешающих ионов используют сульфат гидроксиламина и аскорбиновую кислоту.

Также реакцию с дитизоном используют для выделения ионов свинца из минерализата.

слой хлороформа оранжево-красного цвета
Для маскировки мешающих ионов используют гидроксиламин или цианид калия.
Далее образовавшийся дитизонат разлагают азотной кислотой ,при этом нитрат свинца переходит в водный слой, а дитизонат в хлороформный, окрашивая его снова в зеленый цвет.

3.Токсикологическое значение соединений ртути. Выбор объектов исследования. Особенности изолирования неорганических соединений. Обнаружение и количественное определение ртути. Напишите химизм реакций.

Токсикологическое значение ртути. Металлическая ртуть, а также ее соли имеют широкое и разнообразное применение в производстве люминесцентных, кварцевых и радиоламп, при изготовлении контрольно-измерительных приборов, ртутных выпрямителей, ртутных насосов. Широко используется при электролитическом способе получения хлора, калибровании химической посуды, извлечении золота и серебра из руд и для многих других солей. Из солей ртути особенно широкое применение имеет сулема, несколько меньшее – ртути нитрат, ртути сульфид, сулема, ртуть йодная и др. Красный оксид ртути (II) применяется для получения красок. Хлорид ртути (I), который называется каломель, используется в пиротехнике, а также в качестве фунгицида. Хлорид ртути (II), который называется сулема, является очень токсичным. Сулема применяется в медицине как дезинфицирующее средство, в технике она используется для обработки дерева, получения некоторых видов чернил, травления и чернения стали. В сельском хозяйстве сулема применяется как фунгицид. Широкое применение ртути и ее производных в промышленности и сельском хозяйстве делает возможным соприкосновение с ними довольно большого круга людей. Поэтому могут создаваться условия для отравления (профессиональные, медицинские, бытовые в связи с ошибочными приемами соединений ртути внутрь, при вдыхании паров ртути или ее препаратов, при передозировках и т. п.). Характер и течение ртутных отравлений различны и зависят от способа введения ртути в организм. Пары ртути, попадая в организм через органы дыхания, поражают прежде всего, центральную нервную систему, в первую очередь кору головного мозга. Специфическое действие ртути обусловлено связыванием белковых сульфгидрильных групп, что приводит к нарушению клеточного дыхания и преципитации белков. В случаях отравления солями ртути, принятыми per os, в основном поражаются желудочно-кишечный тракт и почки, а также печень и слюнные железы, т. е. органы, через которые ртуть выделяется. При отравлении солями ртути ощущаются металлический привкус во рту, жгучие боли в пищеводе и желудке, наблюдается рвота и кровавый понос. Ртуть откладывается в печени, почках, меньше в других органах и тканях. Она может быть обнаружена в человеческом организме и в норме. При патологоанатомическом вскрытии трупов лиц, отравленных соединениями ртути, обнаруживается покраснение и набухание (а иногда и некроз) слизистых оболочек пищевода и желудка, воспаление или некроз тканей в толстой кишке и в нижнем отделе тонкой кишки, наличие язв. Если при отравлении ртутью смерть наступает через 10—14 сут, то на вскрытии обнаруживается поражение почек (так называемый сулемовый нефроз).

Так как в организме ртуть накапливается в основном в печени и почках, то в качестве объекта исследования выбирают именно их.
При изолировании ртути из биологического материала общими методами минерализации потери её за счёт улетучивания в условиях высоких температур могут достигать более 90 %. В связи с этим, А.А. Васильева предложила метод деструкции (частичного разрушения) биологического материала. А.Н. Крылова его усовершенствовала.
Деструкция — нарушение структуры биологического материала под влиянием азотной, серной и других кислот, обладающих окислительными свойствами, без полного разрушения органических веществ, переходящих в деструктаты. При деструкции твердых частиц биологического материала он разлагается и переходит в жидкую фазу (деструктат). При деструкции в качестве продуктов разложения твердых частиц биологического материала, переходящих в деструктат, являются молекулы белковых веществ и продукты их частичного кислотного гидролиза (пептиды и аминокислоты), липиды и некоторые другие вещества, входящие в состав тканей организма. Ртуть в биологическом материале находится в связанном виде с сульфгидрильными и некоторыми другими функциональными группами белковых веществ. В процессе деструкции под влиянием сильных кислот при нагревании происходит разрыв прочных ковалентных связей между ртутью и сульфгидрильными или другими функциональными группами белковых веществ. В результате деструкции ртуть переходит в деструктат в виде ионов, которые можно обнаружить и определить с помощью соответствующих реакций и физико-химических методов.
Методика дробного исследования на Hg2+: 20 г средней пробы печени и почки, но не смеси их, помещают (раздельно) в конические колбы объемом 200-300 мл, заливают 5 мл воды, 1 мл этилового спирта и 10 мл концентрированной азотной кислоты. Затем добавляют по каплям 10 мл концентрированной серной кислоты так, чтобы постоянно поддерживалась реакция разложения азотной кислоты с выделением тепла, но окислы азота при этом не выделились из колбы.
В процессе деструкции протекают следующие реакции:
С2Н5ОН + HONO2 <—-> C2H5ONO + Н2O
В процессе реакции образуется небольшое количество N2O3, также вступающего в реакцию со спиртом:
2C2H5OH + N2O3   <—->   2C2H5ONO + H2O; C2H6ONO + HOH <—->   C2H5OH + HNO2
Этиловый спирт играет роль катализатора.
По окончании прибавления серной кислоты колбу оставляют при комнатной температуре на 15 минут до прекращения бурной реакции выделения окислов азота, а затем нагревают на водяной бане в течение 10-20 минут. Если при нагревании реакция протекает слишком бурно с выделением бурых паров окислов азота, то добавляют 30-50 мл горячей воды. Горячий деструктат смешивают с двойным объемом горячей воды и, не охлаждая, фильтруют через двойной увлажненный фильтр. Фильтр с остатками жира промывают не менее 3-4 раз горячей водой. Промывные воды и деструктат объединяют и после охлаждения разбавляют водой до определенного объема. Затем производят качественное обнаружение и количественное определение Hg2+.
Обнаружение и количественное определение ртути.
Для обнаружения ртути в деструктате применяют реакции с дитизоном и с взвесью меди (I) йодида.
а ) реакция с дитизоном:

слой хлороформа желтый или оранжево-желтый
Для осаждения мешающих ионов используют гидроксиламин, аскорбиновую кислоту. б) реакция со взвесью иодида меди (I):
реакция основана на том, что при взаимодействии ионов ртути со взвесью иодида меди (I) образуется красный или оранжево-красный осадок
Cu 2 [HgI 4 ]

Hg2+ + 4 CuI → Cu2[HgI4] ↓ + 2 Cu+
оранжево-красный осадок

реакции мешают окислители, которые при взаимодействии с CuI выделяют свободный йод, окрашивающий суспензию в бурый цвет:
CuI + O2+4H+→I2 + 2Cu2+ +2H2 O

Количественное определение:
для количественного определения ртути используют визуальный колориметрический метод, основанный на реакции с иодидом меди (I), и экстракционно-фотоколориметрический метод, основанный на реакции с дитизоном, который является более точным и надежным (см реакцию а)). Реактивом в данном методе служит раствор дитизона в хлороформе. Перед исследованием строят калибровочный график.
Расчет содержания ртути в биологическом материале производят по калибровочному графику, пользуясь формулой:

А·100
Х=
Б ·Г

где X — содержание ртути в 100 г биологического материала, мкг; А — количество ртути, найденное по калибровочному графику, мкг; Б — объем деструктата, взятый для определения ртути, мл; В — общий объем деструктата, мл; Г — масса биологического материала, взятого на анализ, г.

4.Какие реакции на формальдегид наиболее чувствительны? Какие из реакций обнаружения формальдегида имеют положительное судебно-химическое значение?
Наиболее чувствительной реакцией обнаружения формальдегида является реакция образования «серебряного зеркала»: в хорошо очищенную от жира пробирку вносят 5 капель 1 %-го раствора нитрата серебра и по каплям прибавляют 10%-й раствор аммиака до растворения образовавшегося осадка гидроксида серебра. К полученному раствору прибавляют 1 мл исследуемого раствора, а затем смесь осторожно нагревают на пламени горелки. При наличии формальдегида происходит реакция образования «серебряного зеркала». Эта реакция успешно протекает при рН = 8…9. Нагревание пробирки должно быть умеренным. При высокой температуре «серебряное зеркало» не образуется, а выпадает бурый осадок серебра.

Реакция очень чувствительна, но не специфична, кроме формальдегида эту реакцию дают и другие восстанавливающие вещества.
Реакции, имеющие положительное судебно-химическое значение:
реакция с фуксинсернистой кислотой (реактив Шиффа): в пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 2—3 капли концентрированной серной кислоты. Содержимое пробирки взбалтывают и охлаждают проточной водой, затем прибавляют 1 мл раствора фуксинсернистой кислоты. Появление сине-фиолетовой или красно-фиолетовой окраски указывает на наличие формальдегида:

В присутствии минеральных кислот реакция становится специфичной для формальдегида.
реакция с кодеином в концентрированной серной кислоте:
дистиллят смешивают с пятикратным объемом концентрированной серной кислоты. После охлаждения смеси вносят 0,02-0,03 г порошка кодеина или морфина — тотчас или через несколько минут появляется красно- или сине-фиолетовое окрашивание.
3)реакция с хромотроповой кислотой: в пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора, 0,2 мл 1 %-го раствора хромотроповой кислоты в концентрированной серной кислоте, а затем прибавляют 5 мл концентрированной серной кислоты и взбалтывают. Появление фиолетовой или красно-фиолетовой окраски указывает на наличие формальдегида в исследуемом растворе.

Причины необходимости подкисления полярного растворителя для экстракции из биоматериала алкалоидов и других веществ основного характера. Влияет ли природа соединения, используемого для создания рН, на эффективность экстракции.
Первым методом, предложенным для выделения алкалоидов, был метод Лассаня. Биологический материал кипятили с водой, фильтровали ,затем водную вытяжку упаривали досуха. Сухой остаток растворяли в спирте и использовали для анализа. Однако этот метод имел ряд недостатков:
— основания большинства алкалоидов не растворяются в воде и не экстрагируются из биологического материала;
— сухие остатки алкалоидов, выделенных из биологического материала таким методом, имеют большое количество примесей, мешающих дальнейшему анализу.
Эти причины послужили для поиска других методов выделения. В частности – подкислению полярного растворителя.
На степень извлечения алкалоидов или других веществ основного характера влияет не только природа растворителя, но и природа кислоты, используемой для подкисления воды или этилового спирта. В зависимости от природы кислоты, содержащейся в извлекающей жидкости, ядовитые вещества, находящиеся в биологическом материале, превращаются в нем в соли этой кислоты. Чем лучше растворяются соли ядовитых веществ в извлекающей жидкости, тем легче изолируются эти яды из биологического материала.
6. Характеристика методов очистки от эндогенных веществ, применяемых в химико-токсикологическом анализе лекарственных средств.
Вытяжки, полученные настаиванием биологического материала с подкисленной водой или с подкисленным этиловым спиртом, всегда содержат определенное количество примесей белковых веществ, аминокислот, липидов и других соединений, мешающих обнаружению и количественному определению ядовитых веществ, находящихся в этих вытяжках. Поэтому вытяжки из биологического материала подвергают очистке от примесей. Для этого применяются следующие методы: фильтрование, центрифугирование, осаждение, экстракция и ряд физико-химических методов.
Фильтрование и центрифугирование . Фильтрование используют для очистки вытяжки от механических примесей. Метод имеет ряд недостатков:
– через поры фильтра могут проходить частицы, размер которых меньше диаметра пор фильтра
— на фильтре могут абсорбироваться некоторые количества ядовитых веществ, выделяемых из биологического материала.
Учитывая эти недостатки, больше применяют центрифугирование.
Центрифугирование — этот метод разделение в поле центробежных сил жидких дисперсных систем с частицами размером более 100 нм. Разделение веществ с помощью центрифугирования основано на разном поведении частиц в центробежном поле. В центробежном поле частицы, имеющие разную плотность, форму или размеры, осаждаются с разной скоростью.
Осаждение. Для осаждения примесей, которые прошли через фильтр или остались после центрифугирования используют следующие способы:
— осаждение реактивами. Некоторые реактивы применяют не только для очистки вытяжек из биологического материала, но и для осаждения белковых и других веществ из крови. К числу таких реактивов относятся: трихлоруксусная, вольфрамовая, метафосфорная кислоты; некоторые гетерополикислоты (фосфорно-вольфрамовая, фосфорно-молибденовая) и другие вещества. Причем фосфорно-вольфрамовая и фосфорно-молибденовая кислоты осаждают белки и пептиды, а трихлоруксусная кислота осаждает белки, но не осаждает пептиды.
— температура. Некоторые белки осаждаются под действием температуры. При повышении температуры происходит денатурация белковых веществ. Растворимость их понижается, и они выпадают в осадок. Этот способ очистки вытяжек применяется при выделении алкалоидов из биологического материала по методу Стаса — Отто.
— высаливание. Эффективность высаливания зависит от концентрации и природы электролитов, прибавляемых к растворам или вытяжкам из биологического материала. С повышением концентрации солей, прибавляемых к вытяжкам, растворимость белков понижается, а при дальнейшем прибавлении этих солей белковые вещества могут выпадать в осадок. Меняя концентрацию электролитного раствора можно повышать или понижать растворимость белковых веществ.
Высаливание является одним из эффективных методов осаждения примесей из вытяжек, полученных при настаивании гнилостного биологического материала с подкисленной водой.
Высаливание используется не только для повышения или понижения растворимости белковых веществ. В химико-токсикологическом анализе высаливание может применяться и для повышения степени экстракции многих ядовитых веществ из водных растворов.
— изменение рН среды. При рН, соответствующем изоэлектрической точке белка, белок не несет суммарного заряда. Поэтому, при указанном рН между соседними молекулами белка отсутствует электростатическое отталкивание. В результате этого происходит слипание молекул белка и выпадение его в осадок. При значениях рН выше или ниже изоэлектрической точки белка его молекулы имеют суммарный заряд одного знака, и поэтому выпадение белка в осадок не происходит.
Метод осаждения имеет также и недостатки. Осадки примесей могут адсорбировать на своей поверхности некоторые количества токсических веществ, подлежащих исследованию. Это может быть одной из причин потерь исследуемых веществ в ходе химико-токсикологического анализа.
Экстракция. Экстракция-это процесс извлечения растворителями соответствующих веществ из различных объектов. Этот метод в химико-токсикологическом анализе применяется наиболее часто. При помощи метода экстракции можно очистить вытяжки от липидов, аминокислот, продуктов их декарбоксилирования и дезаминирования, а также от ряда других примесей. Для успешной экстракции примесей необходимо правильно подобрать несмешивающийся с водой органический растворитель и соответствующее значение рН среды, из которой извлекают примеси. При неправильно выбранном рН среды совместно с примесями может экстрагироваться и определенное количество исследуемого вещества. Экстракция примесей должна производиться при таком значении рН среды, при котором не экстрагируются исследуемые вещества, находящиеся в вытяжках.
Физико-химические методы очистки. Это методы ионообменной хроматографии, гель-хроматографии, молекулярной адсорбционной хроматографии на колонках и др. Наиболее распространенной является тонкослойная хроматография, благодаря своей доступности, простоте выполнения и высокой разрешающей способности.
Электродиализ .В этом методе в диализаторе создается электрическое поле, под действием которого ускоряется переход алкалоидов в водное извлечение через полупроницаемую мембрану, которая не пропускает крупные молекулы белков и продукты их распада, за счет чего и достигается очистка.
7.Частный метод изолирования алкалоидов (метод В.Ф. Крамаренко). Условия, факторы, влияющие на изолирование алкалоидов, достоинства и недостатки метода.
Частный метод изолирования подкисленной водой был предложен В. Ф. Крамаренко. Его исследованиями было показано влияние рН среды и природы кислоты на изолирование алкалоидов из объектов белкового происхождения водой, влияние рН среды и природы органического растворителя на экстрагирование некоторых токсикологически важных алкалоидов из водных извлечений, влияние электролита на полноту экстрагирования. Вопросу влияния рН среды  на изолирование и экстрагирование  алкалоидов, В. Ф. Крамаренко придает исключительно большое значение. Несоблюдение оптимальных условий рН среды при извлечении алкалоидов водой из биологического материала животного происхождения является одной из причин значительных потерь этих веществ в общем ходе химико-токсикологического анализа.
Схема анализа. Схема метода состоит из следующих этапов:
· Настаивание измельченного объекта с водой, подкисленной 20% раствором серной кислоты до рН2-3, в течение двух часов. Вода берется в количестве 1:2 по отношению к навеске объекта. Водное извлечение фильтруется. Операция повторяется двукратно. Постоянно контролируют значение рН. Отфильтрованные порции полученной жидкости центрифугируют.
· Очистка водного извлечения от белковых соединений путем насыщения его сульфатом аммония (рН=2,5 должно сохраняться), настаивания в течение часа и центрифугирования образовавшегося осадка.
· Очистка фильтрата от жиров, смол, пигментов путем экстракции эфиром. Эфирное извлечение отбрасывают.
· Подщелачивание водного извлечения 20% раствором гидроксида натрия и экстрагирование веществ основного характера хлороформом при рН=9-10 (трехкратная экстракция), отделение органической фазы и концентрирование полученного извлечения упариванием.

Н2О + H2SO4
100 г органа водное извлечение (соли алкалоидов)
2 раза по 2 часа,рН=2,5
(NH4)2 SO4 Эфир
фильтрат экстрагирование балластных в-в, рН=2 водное извлечение +NaOH,

CHl3, 3 раза
pH=9-10 хлороформный экстракт (основания алкалоидов).

Преимущества метода:1. Ускорение времени производства  анализа в 3-4 раза.2. Более высокая чувствительность  по отношению к ряду органических  веществ: стрихнину, бруцину, кониину, колхицину, дикаину, ареколину и другим соединениям. Повышение чувствительности в основном связано с меньшим количеством операций, возможно, и с отсутствием нагревания.3. Метод не требует  затраты чистого этилового спирта. Недостаток метода заключается в трудности использования его для исследования на органические вещества, трудно растворимые в воде, а иногда также при исследовании сильно загнившего трупного материала.

8.Наличие какого вещества в объекте можно предполагать, если извлечения из кислой и щелочной среды дают окрашивание только с одним из «цветных» реактивов (сине-фиолетовое, переходящее в морковно-оранжевое)? Состав хромогенных («цветных») реактивов и техника проведения реакций.
По реакции только с одним из «цветным» реактивов можно предположить
наличие стрихнина.

стрихнин
Из «цветных реактивов», стрихнин дает цветную реакцию только с реактивом Манделина. Реактив Манделина – это раствор ванадата аммония в концентрированной серной кислоте. Реактив используют свежеприготовленным.
Техника выполнения: часть хлороформной вытяжки из щелочной среды вносят в фарфоровую чашку или в углубления на фарфоровых пластинках. Хлороформ выпаривают досуха. На сухой остаток наносят по капле реактива Манделина. Образуется сине-фиолетовое окрашивание переходящее в красное. Избыток кислоты мешает проведению реакции.

9.Проведите судебно-химическую экспертизу смертельного отравления смесью барбитала и кофеина. Укажите схему проведенного Вами анализа. Обоснуйте выбор оптимального объекта исследования и метода изолирования. Проведите качественное и количественное определения веществ в полученных экстрактах. Химизм.
Барбитал, производное барбитуровой кислоты, извлекается из кислого раствора полярным растворителем. Большая часть введенного барбитала выводится в неизменном виде с мочой.
Кофеин – производное ксантина, извлекается из ксилого раствора полряным растворителем. Наиболее оптимальным является хлороформ. При поступлении в организм быстро всасывается из пищевого канала и быстро разлагается в организме.
В качестве объектов исследования берут содержимое желудка, печень, почки, моча. Более оптимально взять почки.
Метод изолирования: изолирование водой, подкисленной щавелевой кислотой:
1) в коническую колбу или стакан вносят 100 г тщательно измельченных органов трупов, прибавляют 200 мл воды, подкисляют насыщенным водным раствором щавелевой кислоты до рН = 2 (по универсальному индикатору) и оставляют на 2 ч при частом перемешивании.
2) затем содержимое колбы переносят в стакан для центрифугирования вместимостью 500 мл и центрифугируют в течение 30 мин (3000 об/мин). Центрифугат сливают с осадка и процеживают через ватный тампон. Процеженную жидкость собирают в делительную воронку и проверяют рН этой жидкости. В случае необходимости жидкость доводят до рН = 2.
3) содержимое делительной воронки взбалтывают с тремя порциями хлороформа (по 20, 15 и 15 мл) в течение 5 мин. Если образуется эмульсия, то ее разрушают центрифугированием.
4) хлороформные вытяжки соединяют, доводят хлороформом до 50 мл и переносят в делительную воронку, в которую прибавляют 25 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия, и взбалтывают. Водную фазу отделяют от хлороформной вытяжки. Эту вытяжку взбалтывают с двумя порциями воды по 1,5 мл. Первую и вторую порции воды (по 1,5 мл), которыми промывали хлороформные вытяжки, присоединяют к щелочной водной фазе. Потом водную фазу подкисляют соляной кислотой до рН = 2, вносят в делительную воронку и взбалтывают с двумя новыми порциями хлороформа (по 20 мл) в течение 5 мин. Хлороформные вытяжки соединяют и доводят хлороформом до 50 мл.

Биоматериал, 100 г

В коническую колбу + 200 мл воды
↓ + подкисление раствором щавелевой кислоты до рН=2
Настаивание 2 ч (через 5- 10 мин проверяют значение рН, при необходимости доводят до рН=2 ).

Центрифугирование, фильтрование центрифугата, контроль РН.

Трехкратное экстрагирование центрифугата хлороформом (по 20, 15 и 15 мл) в течение 5 мин

Объединение хлороформных вытяжек (делительная воронка)
+ 25 мл NaOH

водная фаза (щелочная) хлороформная вытяжка
+ 1,5 мл воды, 2 раза

Промывные воды хлороформная вытяжка

+ подкисление HCl до рН=2
делительная воронка
+ двукратное экстрагирование хлороформом
Хлороформная вытяжка

Исследование

Обнаружение барбитала.
барбитал
Предварительная проба – к части остатка после испарения хлороформа в
фарфоровой чашке , добавляют каплю свежеприготовленного аммиачного раствора нитрата кобальта (раствор готовится перед употреблением, из
равных объемов 1% раствора нитрата кобальта и 25% раствора аммиака) или каплю 1 % раствора нитрата кобальта и каплю 25% раствора аммиака. При наличие барбитала появляется красно-фиолетовое окрашивание:

,где R1 =R2=С2Н5
Реакция имеет отрицательное судебно-химическое значение. При отрицательном результате дальнейшее исследование на барбитал не проводят. При положительном – проводят следующие частные реакции подлинности на барбитал:
1)реакция с серной кислотой (образование кристаллов характерной формы):
на предметное стекло наслаивание наносят хлороформный экстракт. Полученный сухой остаток растворяют в капле серной кислоты ,радяом наносят каплю воды, после чего обе капли осторожно смешивают. Наблюдают образование кристаллов в виде бесцветных прозрачных прямоугольных призм.

Реакция специфична .но обладает низкой чувствительностью.
2)реакция с хлорцинкйодом:на предметное стекло наносят экстракт, испаряют досуха. К сухому остатку добавляют каплю раствора хлорцинкйода. Образуются кристаллы в виде прямоугольных пластин темно-красного, зеленого, фиолетового, серо-розового цветов.

3)реакция с подкисленным спиртовым раствором KI: к сухому остатку на предметном стекле добавляют каплю реактива. Образуются кристаллы в виде пластин с рассеченным концами зеленого, красного, серо-зеленого цвета:

4)реакция с меднопиридиновым реактивом: к сухому остатку на предметном стекле добавляют каплю 25%-го раствора аммиака и каплю меднопиридинового реактива. Образуется сиреневый осадок, под микроскопом наблюдаются кристаллы в виде простых и сложных крестов, друз, звездочек и прямоугольников.

меднопиридиновый комплекс барбитуратов

Количественное определение барбитала.
Количественное определение барбитала проводят фотометрическим методом. Метод основан на реакции взаимодействия барбитала с ацетатом кобальта в присутствии изопропила и метанола. В результате реакции образуется фиолетовое окрашивание:
, где R1 =R2=С2Н5
Измеряют оптическую плотность полученного раствора.

Определение кофеина.

Предварительная проба – с общеалкалоидными осадительными реактивами Бушарда, Шейблера, Зонненштейна образуется осадок или муть. Реакция имеет отрицательное судебно-химическое значение. При отрицательном результате дальнейшее исследование на кофеин не проводят. При положительном результате проводят следующие реакции обнаружения:
1)«мурексидная проба»: часть хлороформного извлечения выпаривают в фарфорой чашке, добвляют 1 мл раствора брома в воде, выпаривают досуха. Осадок окрашивается в красный или в красно-бурый цвет, который при добавлении капли 25%-го раствора аммиака переходит в пурпурный или фиолетовый:

2)реакция с хлоридом ртути (II): на сухой остаток на предметном стекле наносят по каплям 5%-ый раствор хлорида ртути (II). Образуются крупные шелковистые бесцветные иглообразные кристаллы.

3)реакция с раствором золотобромистоводородной ксилоты: к сухому остатку на предметном стекле наносят каплю реактива Льюиса (5% р-р AuCl3 + конц. HCl +ацетон, 1:1:1). К полученному осадку добавляют несколько кристаллов бромида калия – осадок окрашивается в оранжево-красный цвет. Под микроскопом это крупные желтовато-коричневые и бесцветные иглы.

Количественное определение.
Количественное определение кофеина проводят методом ГЖХ и ВЭЖХ.

10.Судебно-химическое доказательство отравления карбофосом. Рецептор токсичности. Методы изолирования и очистки. Способы обнаружения и количественного определения.
Карбофос — бесцветная с характерным неприятным запахом, жидкость. Технический препарат представляет собой темно-бурую жидкость с неприятным запахом, содержит примеси диэтилдитиофосфорной кислоты, ксилола и др

Рецептор токсичности: в организме карбофос окисляется с образованием малаоксона, обладающего выраженной антихолинэстеразной активностью. При отравлении карбофосом появляются слюнотечение, рвота, понос, одышка, цианоз и т. д.
Методы изолирования и очистки: в колбу вместимостью 500 мл вносят 100 г мелкоизмельченного биологического материала, прибавляют воду до получения кашицеобразной массы и 100 мл хлороформа. Содержимое колбы оставляют на 4 ч при частом взбалтывании. Затем отделяют хлороформную вытяжку, а биологический материал еще 2 раза настаивают с хлороформом (порциями по 50 мл) в течение 2 ч при частом взбалтывании. Хлороформные вытяжки соединяют, фильтруют и выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 10 мл хлороформа. В полученном растворе определяют наличие карбофоса.

Обнаружение.
1) реакция с диазотированной сульфаниловой кислотой. Несколько миллилитров хлороформного раствора или хлороформной вытяжки вносят в пробирку и жидкость выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 2 мл воды, 1 мл раствора диазотированной сульфаниловой кислоты и 0,5 мл 5 %-го раствора гидроксида натрия. Появление вишнево-красной окраски указывает на наличие карбофоса в исследуемом растворе.
2) реакция с реактивом Марки. В фарфоровую чашку вносят несколько миллилитров хлороформного раствора исследуемого препарата, который выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 5-10 капель реактива Марки. Появление оранжевой окраски, которая через некоторое время переходит в темно-коричневую, указывает на наличие карбофоса в исследуемом растворе.
Выполнению этой реакции мешает эмульгатор ОП-7, который содержится в технических препаратах карбофоса и в некоторых других ядохимикатах.
3)реакция с сульфатом меди. К сухому остатку после выпаривания экстракта прибавляют 1 мл 10% — го раствора NaOH, нагревают на водяной бане, доводят до рН=4…5 25%-ой серной кислотой. Прибавляют 1 мл хлороформа и 2 капли 10%-го раствора сульфата меди(II).хлороформный слой окрашивается в зеленовато-желтый цвет.
4)метод ТСХ.
Количественное определение.
1)фотометрический метод – основан на минерализации с помощью серной и азотной кислот. Определенное количество извлечения переносят в колбу Кьельдаля, добавляют 3 мл концентрированной серной, 10 мл концентрированной азотной кислот. Нагревают до просветления жидкости и появления белых паров. Остывший раствор доводят водой до объема, добавляют молибдат аммония и бензидин. Образуется синее окрашивание. Измеряют оптическую плотность полученного раствора.

2)метод ГЖХ – анализ проводят по высоте или площади пика.

Ситуационные задачи.

Найден труп гражданина Х. Провести химико-токсикологическую экспертизу внутренних органов и остатков порошка для установления отравления морфином и мышьяком.
Объект исследования: внутренние органы, остатки порошка. Объекты, направляемые судебно-следственными органами в лаборатории для судебно-химического исследования, называются вещественными доказательствами. Одновременно с направлением в судебно-химическую лабораторию перечисленных объектов направляется сопроводительное письмо судебно-медицинского эксперта или постановление следователя о назначении экспертизы. В этих документах должны быть кратко указаны обстоятельства дела, фамилия, имя, отчество и возраст умершего, каким ядом могло быть вызвано отравление, вопросы, подлежащие разрешению при судебно-химическом анализе, и т. д. Морфин.

Белое или желтоватое вещество, слабо растворимое в воде, спирте, хлороформе. Соли морфина растворимы в воде и спирте, нерастворимы в эфире.
Токсикологическое значение: в медицине применяется гидрохлорид морфина. Этот препарат является основным представителем группы наркотических анальгетиков. Морфин оказывает сильное болеутоляющее действие, понижает возбудимость болевых центров, оказывает противошоковое действие при травмах и т. д. Морфин вызывает эйфорию. При повторном применении морфина к нему быстро развивается болезненное пристрастие (морфинизм). Слабо всасывается в кровь через пищеварительную систему. После парентерального введения морфина в организм максимальный уровень его в крови достигается примерно через 1 ч. Метаболизм: в организме основное количество морфина связывается с глюкуроновой кислотой и в виде глюкуронида выделяется с мочой. За первые 8 ч после введения морфина 50 % его выделяется с мочой в виде глюкуронида, а за 24 ч выделяется из организма примерно 90 % глюкуронида морфина. В организме незначительная часть морфина подвергается N-деметилированию (образуется норморфин) и О-метилированию (образуется кодеин). В органах трупов морфин постепенно превращается в псевдоморфин (оксидиморфин, дегидроморфин), по которому определяют отравление морфином.
Химико-токсикологическое исследование морфина.
В качестве объекта исследования можно использовать остатки порошка, поступившего на анализ.
Метод извлечения: пробу порошка обработать этанолом (10 мл),профильтровать. Фильтрат обработать водой (10 мл), снова профильтровать. Провести качественный и количественный анализ.
Обнаружение Морфина:
1) реакции с реактивами группового осаждения алкалоидов. Морфин дает осадки с реактивами группового осаждения алкалоидов (реактивы Бушарда, Драгендорфа, Майера, Зонненшейна и др.). 2) цветные реакции: с реактивом Марки- красно-фиолетовое окрашивание;
с реактивом Фреде – фиолетовое окрашивание; с реактивом Манделина – фиолетовое окрашивание; с реактивом Эрдмана – красное, переходящее в желтое.
3) реакция с хлоридом железа (III) : к сухому остатку в фарфорой чашке прибавить 1—2 капли свежеприготовленного 2 %-го раствора хлорида железа (Ш). При наличии морфина появляется синяя окраска. 4) Реакция с йодноватой кислотой (НIO 3 ). Часть раствора, слабо подкисленного серной кислотой,взболтать с раствором йодноватой кислоты или раствором иодата калия (KIO 3 ), не содержащего иодидов. Добавитьхлороформ, взболтать. Выделяется свободный иод, который при взбалтывании с хлороформом переходит в хлороформный слой, окрашивая его в фиолетовый цвет.
Эту реакцию дают и некоторые примеси, которые переходят в хлороформную вытяжку при выделении морфина из биологического материала. Поэтому реакцию с HIO 3 можно применить для обнаружения морфина в препарате и смесях лекарственных веществ, а также в хорошо очищенных вытяжках из биологического материала.
5) микрокристаллоскопия : образование кристаллов характерной формы с соответствующими реактивами.
с реактивом Рейнеке – сростки из игл сиреневого цвета; с йодидом кадмия – бесцветные иглы; с хлоридом ртути (II) – бесцветные иглы; с пикролоновой кислотой – желтые «пятаки»; с реактивом Бушарда – красные пластины.
Количественное определение.
Фотоколориметрический метод: основанный на реакции этого алкалоида с кремне-молибденовой кислотой, в результате которой возникает синяя окраска (по В. Ф. Крамаренко).
Техника определения: в мерную колбу вместимостью 25 мл вносят 3 мл 0,11 %-го раствора силиката калия K 2 SiO 3, 4 мл воды, 2 мл 0,5 н. раствора соляной кислоты и 2 мл 5 %-го раствора молибдата аммония. Через 3 мин прибавляют 2 мл исследуемого раствора и 5 мл 6 %-го раствора аммиака. Через 10 мин объем жидкости доводят водой до метки и измеряют оптическую плотность окрашенного в синий цвет раствора.

Соединения мышьяка — мышьяковистый ангидрид, арсенит калия; арсенит натрия; арсенат кальция; осарсол; миарсенол; новарсенол. Применяются в качестве зооцидов (приманки для уничтожения грызунов), инсектоакарицидов, антигельмйнтных средств.
Токсикологическое значение: растворимые препараты всасываются легко и поэтому, как правило, более токсичны. Нерастворимые соли всасываются хуже. Через поврежденную кожу и раневую поверхность мышьяк резорбцируется в 10-15 раз быстрее, чем в желудочно-кишечном тракте. Поступая из желудочно-кишечного тракта в кровь, мышьяк поглощается различными тканями неравномерно. Наибольшее количество мышьяка откладывается обычно в волосах, ногтях, почках и печени. Через 7-10 суток после однократного попадания в организм количество мышьяка почти во всех тканях резко уменьшается. Дольше всего остатки мышьяка сохраняются в волосах, печени и жире. Основная масса мышьяка (около 75%) выводится через почки, остальная часть — с фекалиями, через кожу с потом, с молоком и маточными истечениями. Неорганический мышьяк легко проникает через плацентарный барьер. В случаях хронической интоксикации концентрация мышьяка в тканях постепенно возрастает (примерно в течение 2-3 недель), а затем несколько снижается. Мышьяк относится к протоплазматическим ядам, вызывающим нарушение обмена веществ и поражение эндотелия кровеносных сосудов. Воздействие на капилляры характеризуется понижением их тонуса с расширением просвета и последующим параличом.
Метаболизм. Мышьяк выводится из организма через почки с мочой, кишки и через некоторые железы. Выделение мышьяка из организма происходит медленно, чем и обусловлена возможность его кумуляции. В экскрементах мышьяк еще можно обнаружить через несколько недель, а в трупном материале — и через несколько лет после смерти.
Метод изолирования. Объект исследования – внутренние органы, поступившие на анализ.
Для изолирования используется метод минерализации смесью концетрированных серной, азотной кислот и воды.

Биоматериал, 100 г

В колбу Кьельдаля 500-800 мл
↓ + 75 мл смеси концентрированных HNO3 и H2SO4 (1:1), нагревание
Деструкция (30-40 мин)
↓ + по каплям концентрированная HNO3
Окисление (выделение белых паров H2SO4, минерализат не чернеет)

Охлаждение минерализата
↓ + 10-15 мл воды очищенной, нагретой до 110-130°С
↓ + формалин по каплям
Денитрация
↓ + раствор дифениламина в H2SO4 на предметном стекле
Проверка полноты денитрации

Отсутствие синей окраски
↓ + 4-хкратный объем воды, нагревание 10-20 мин, отстаивание 1 сутки
Раствор декантируют, осадок промывают 10мл 1% раствором H2SO4 и 10 мл воды очищенной

Осадок (отбрасывают)Фильтрат + промывные воды

Обнаружение и количественное определение
Обнаружение соединений мышьяка. Предварительные пробы:
а) реакция Зангер — Блека основана на восстановлении соединений мышьяка до мышьяковистого водорода, который затем на фильтровальной бумаге реагирует с хлоридом или бромидом ртути (II).
В колбу, содержащую исследуемый раствор (или стандартный раствор мышьяка при количественном его определении), добавляют 10 мл 20% раствора серной кислоты, 5 мл воды, 1 мл 10% раствора SnCl2 в концентрированной серной кислоте, затем вносят 2 г купрированного мелко гранулированного цинка. Колбу закрывают насадкой, в которую вложена бумага, пропитанная бромидом (хлоридом) ртути, и вставлен тампон уксусно-свинцовой ваты. Через 60 минут реактивную бумагу снимают, отмечают ее окраску и проявляют пятно.
H2SO4 + Zn = 2H + ZnSO4;
H3A.sO4 + 8Н = АsН3 + 4Н2O;
H3As + HgBr2(HgCI8) = HBr + AsH2•HgBr;
AsH2•HgBr + HgBr2 = HBr + AsH(HgBr)2;
AbH(HgBr)2 + HgBr2 = HBr + As(HgBr)3;
H3Ats+ Ab(HgBr)3 = ЗНВг + As2Hg3

б) реакция с раствором диэтилдитиокарбамата серебра в пиридине. При выполнений этой реакции находящиеся в минерализате соединения мышьяка восстанавливают до мышьяковистого водорода, который собирают в пробирку (приемник), содержащую свежеприготовленный раствор диэтилдитиокарбамата серебра в пиридине.. При наличии мышьяка в минерализате раствор диэтилдитиокарбамата серебра приобретает устойчивую красно-фиолетовую окраску. При отрицательном результате этих реакций исследование минерализата на наличие мышьяка не производится. При положительном результате указанных реакций на мышьяк дополнительно выполняют реакцию Марша. Реакция Марша .Основана на восстановлении соединений мышьяка водородом в момент его выделения и на последующем термическом разложении образовавшегося при этом мышьяковистого водорода: мышьяк, образовавшийся при термическом разложении мышьяковистого водорода, откладывается на стенках восстановительной трубки аппарата Марша в виде налета («мышьякового зеркала»). Реакция Марша является наиболее доказательной из всех реакций, рекомендованных для обнаружения мышьяка в различных объектах. Она не только позволяет обнаружить малые количества мышьяка, но и отличить его от сурьмы. В основе метода лежат следующие реакции:
Н2SO4 + Zn = ZnSO4 + 2H
H3AsO4 +  8Н = H3As + 4Н2O
Реакцию Марша выполняют в специальном аппарате.

При обнаружении мышьяка по Маршу необходимо соблюдать ряд условий: исследовать не более 20 мл минерализата, полная герметизация прибора, 4 п. раствор H2SO4, полное вытеснение воздуха из прибора, тугоплавкая восстановительная трубка, температура разложения AsH3>350°, максимальное восстановление 60 минут. Количественное определение.
1) объемным методом: определение по избытку нитрата серебра, не вошедшего в реакцию с AsH3:
АsН3 + 6AgNO3 + 6NH4OH = 6Ag + Н3АsO3 + 6NH4NO3 + 3H2O
титрованием роданидом аммония в присутствии железоаммоний-ных квасцов.
2)фотоколориметрическим методом по Зангер-Блеку.
Выбор метода определяется результатами обнаружения мышьяка.

В конце исследования составляется акт ХТА , который обладает юридической силой.

Провести химико-токсикологическую экспертизу внутренних органов, крови и мочи на этанол, стрихнин.
Объект исследования: внутренние органы, кровь, моча.
Этанол.
Объект исследования: кровь, моча.Этиловый спирт С2Н5ОН (этанол, этиловый алкоголь, винный спирт)- бесцветная, летучая жидкость с характерным запахом, жгучая на вкус (пл. 0,813—0,816, т. кип. 77—77,5 °С). Этиловый спирт горит синеватым пламенем, смешивается во всех соотношениях с водой, диэтиловым эфиром и многими другими органическими растворителями, перегоняется с водяным паром.
Токсикологическое значение. Этиловый спирт может поступать в организм несколькими путями: при приеме внутрь, при внутривенном введении, а также через легкие в виде паров с вдыхаемым воздухом.
Поступивший в организм этиловый спирт действует на кору головного мозга. При этом наступает опьянение с характерным алкогольным «возбуждением». В больших дозах этиловый спирт вызывает угнетение функций как спинного, так и продолговатого мозга. При этом может наступить состояние длительного глубокого наркоза с потерей рефлексов и угнетением жизненно важных центров. Под влиянием этилового спирта может наступить смерть в результате паралича дыхательного центра.
Степень токсичности этилового спирта зависит от дозы, концентрации его в напитках, от наличия в них сивушных масел и других примесей, прибавляемых для придания напиткам определенного запаха и вкуса. Ориентировочно смертельной дозой для человека считается 6—8 мл чистого этилового спирта на 1 кг массы тела. В пересчете на всю массу тела это составляет 200—300 мл этилового спирта.
Длительное злоупотребление этиловым спиртом приводит к хроническому отравлению (алкоголизму).
Метаболизм. Этиловый спирт неравномерно распределяется в тканях и биологических жидкостях организма. Это зависит от количества воды в органе или биологической жидкости. Количественное содержание этилового спирта прямо пропорционально количеству воды и обратно пропорционально количеству жировой ткани в органе. Учитывая большой объем крови в организме, в ней накапливается значительно большее количество этилового спирта, чем в других органах и тканях. Поэтому определение этилового спирта в крови имеет большое значение для оценки количества этого спирта, поступившего в организм. Имеется определенная зависимость между количеством этилового спирта в крови и моче. В первые 1—2 ч после приема этилового спирта (спиртных напитков) концентрация его в моче несколько ниже, чем в крови. В период элиминации содержание этилового спирта в моче, превышает содержание его в крови. Эти данные имеют большое значение для установления времени, прошедшего с момента приема этилового спирта до момента исследования.
Большое значение в диагностике опьянений и отравлений этиловым спиртом имеют результаты количественного определения этого спирта, которые выражают в промилле (% 0 ), что означает тысячную долю.
Часть этилового спирта (2—10 %) выделяется из организма в неизмененном виде с мочой, выдыхаемым воздухом, потом, слюной, калом и т. д Остальное количество этого спирта подвергается метаболизму. Причем метаболизм этилового спирта может происходить несколькими путями. Определенное количество этилового спирта окисляется с образованием воды и оксида углерода (IV). Несколько большее количество этого спирта окисляется до уксусного альдегида, а затем до уксусной кислоты.

Метод изолирования — используется метод перегонки с водяным паром.
Биологический материал смешивают с дистиллированной водой и помещают в круглодонную колбу (2) с таким расчетом, чтобы колба была заполнена не более чем на 1/3 ее объема. Объект подщелачивают до рН=9…10 Колбу с объектом закрепляют в штативе и закрывают пробкой так, чтобы конец стеклянной трубки, вводящей пар, доходил почти до дна колбы. После этого соединяют все части прибора и доводят водяную баню до кипения. Дистилляция производится по возможности медленно, так, чтобы можно было считать капли в приемнике. Это достигается регулированием нагревания парообразователя. Дистиллят собирают в раствор хлористоводородной кислоты. Приёмник должен быть охлажден, чтобы предотвратить испарение спирта.
После окончания дистилляции сначала отсоединяют от парообразователя колбу с биоматериалом, потом прекращают нагревать парообразователь и водяную баню.
Обнаружение.
Предварительные пробы:
а) реакция с дихроматом калия : К 1 мл мочи прибавляют 1 мл 10 %-го раствора дихромата калия в 50%-м растворе серной кислоты. Появляется зеленое окрашивание и ощущается характерный запах ацетальдегида (запах
резаных яблок). (при присутсвии этанола).

б) реакция окисления перманганатом калия в пристуствии серной кислоты:
к 2 мл мочи по каплям прибавляют 5 °/о-й раствор перманганата калия до тех пор, пока перманганат не перестанет обесцвечиваться. Затем в пробирку по каплям прибавляют 10 %-й раствор щавелевой кислоты до обесцвечивания раствора. После этого прибавляют еще одну каплю раствора щавелевой кислоты. К этой жидкости прибавляют 0,1 г хромотроповой кислоты и осторожно по стенкам пробирки приливают 1,5 мл концентрированной серной кислоты с таким расчетом, чтобы кислота попала под дистиллят и не смешалась с ним. Появление красной или фиолетовой окраски на границе раздела двух жидкостей указывает на наличие этилового спирта в исследуемом объекте.
При положительных результатах двух проб провести дальнейшее обнаружение и количественное определение этанола.

Основной метод обнаружения этанола непосредственно в крови и моче – метод ГЖХ. Для этого предварительно переводят этанол в более летучее вещество – этилнитрит. Для этого к этиловому спирту прибавляют нитрит натрия или калия и трихлоруксусную кислоту:

С2Н5ОН + ССl 3 СООН + KNO 2 —> C2H5ONO + CC13COOK + Н 2 О.

В качестве эталонного вещества применяют 95 %-й этиловый спирт.
Идентификацию ведут по обнаружению пика с параметрами удерживания, характерными для этилнитрита.
При положительном результате исследования, наличие этанола подтверждают химическими реакциями.
1)йодформная проба: в пробирку внести 1 мл исследуемого раствора и 2 мл 5 %-го раствора гидроксида натрия или карбоната натрия, по каплям прибавить 1 %-й раствор иода в 2 %-м растворе иодида калия до слабо-желтой окраски. Несколько минут нагреть на водяной бане (50 °С). Ощущается запах йодоформа. При относительно больших количествах этилового спирта в пробе образуются кристаллы йодоформа, имеющие форму шестиугольников и звездочек:

I2 + 2NaOH → NaOI + NaI + H2O
C2H5OH + NaOI → CH3COH + NaI + H2O
CH3COH + 3NaOI →CI3COH + 3NaOH
CI3COH + 3NaOH → CHI3 + HCOONa

Чувствительность реакции 0,04 мг.
2) Реакция этерификации (образование этилацетата): к 1 мл исследуемого раствора добавить0,1 гвысушенного ацетата натрия, затем осторожно по каплям прибавить 2 мл концентрированной серной кислоты. Смесь нагреть на кипящей водяной бане до выделения пузырьков газа. После охлаждения пробирки ощущается запах этилацетата, который появляется более отчетливо, если содержимое пробирки вылить в 20-25 кратный объем воды.

2C2H5OH + 2CH3COONa + H2SO4 → 2CH3COOC2H5 + Na2SO4 + 2H2O

Чувствительность реакции 15-20 мг.
Количественное определение. Определение проводят методом ГЖХ. В качестве внутреннего стандарта применяют пропиловый спирт.
Во флакон из-под пенициллина внести 2 мл раствора внутреннего стандарта (пропилового спирта, концентрация которого составляет 4% 0 ), прибавить 2 мл крови или мочи, подлежащей исследованию на наличие этилового спирта. Содержимое флакона хорошо взболтать, а затем 1 мл жидкости (смеси крови или мочи с внутренним стандартом) перенести в другой флакон из-под пенициллина и прибавить 0,5 мл 50 %-го раствора трихлоруксусной кислоты. Флакон закрыть резиновой пробкой, которую закрепляют фиксатором. При помощи шприца через пробку во флакон внести 0,25 мл 30%-го раствора нитрита натрия. Содержимое флакона взбалтать в течение одной минуты. Затем при помощи другого сухого шприца отобрать из флакона 3 мл газообразной фазы, которую перенести в дозатор хроматографа, и проводят хроматографирование.
На хроматограмме определяют площади или высоты пиков и рассчитывают отношение площади или высоты пика этилового спирта к площади или высоте пика внутреннего стандарта. На основании этого отношения, умноженного на 100, по калибровочному графику рассчитывают содержание этилового спирта в крови или в моче (в % 0 ).

Стрихнин.
Объект исследования: внутренние органы.

Стрихнин — основание представляет собой кристаллическое вещество. Температура плавления 268-290° (зависит от скорости нагревания). Основание алкалоида плохо растворимо в воде (1 : 6000 при 25°) и эфире (I : 5500 при 25°), легко растворяется в 90% спирте (1 : ПО при 25° и 1 : 28 при 60°), бензоле и очень хорошо в хлороформе (1:6 при 25°).
Токсикологическое значение: в медицинской практике в основном применяется нитрат стрихнина и настойка рвотного ореха (чилибухи). Стрихнин возбуждает центральную нервную систему, повышает рефлекторную возбудимость. Стрихнин оказывает сильное ядовитое действие на организм. После поступления в организм токсических доз стрихнина быстро появляются признаки отравления этим алкалоидом. Наступают часто повторяющиеся судороги.
Метаболизм: стрихнин быстро всасывается из пищевого канала, легко проникает в кровь через слизистые оболочки и неповрежденную кожу. Около 80 % дозы стрихнина метаболизируется в печени. Остальное количество этого алкалоида медленно выделяется с мочой в неизмененном виде.
Методы изолирования – изолирование водой, подкисленной щавелевой кислотой.
Биоматериал, 100 г

В коническую колбу + 200 мл воды
↓ + подкисление раствором щавелевой кислоты до рН=2
Настаивание 2 ч (через 5- 10 мин проверяют значение рН, при необходимости доводят до рН=2 ).

Центрифугирование, фильтрование центрифугата, контроль РН.

Трехкратное экстрагирование центрифугата хлороформом (по 20, 15 и 15 мл) в течение 5 мин

водная фаза хлороформная вытяжка

NH4 OH

водная вытяжка (щелочная)

CHCl3, экстракция (3 раза)

Хлороформный экстракт

Обнаружение и количественное определение

Обнаружение.
1)предварительные пробы: с общеалкалоидными осадительными реактивами: – с общеалкалоидными осадительными реактивами Бушарда, Шейблера, Зонненштейна образуется осадок или муть. Реакция имеет отрицательное судебно-химическое значение. При отрицательном результате дальнейшее исследование на кофеин не проводят. При положительном результате проводят подтверждающие реакции подлинности.
2) «цветная» реакция: стрихнин дает цветную реакцию только с реактивом Манделина. Реактив Манделина – это раствор ванадата аммония в концентрированной серной кислоте: часть хлороформной вытяжки из щелочной среды вносят в фарфоровую чашку или в углубления на фарфоровых пластинках. Хлороформ выпаривают досуха. На сухой остаток наносят по капле реактива Манделина. Образуется сине-фиолетовое окрашивание переходящее в красное. Избыток кислоты мешает проведению реакции.
3)реакция окисления с дихроматом калия в концентрированной серной кислоте: часть остатка по испарении хлороформа из щелочного извлечения смешать при помощи стеклянной палочки в фарфоровой чашечке с каплей концентрированной серной кислоты и внести небольшой кристаллик би-хромата калия. При осторожном передвижении кристалла палочкой или при покачивании чашечки появляется окрашивание в виде характерных струек синего цвета, относительно быстро переходящих в фиолетовые, красные и затем исчезающие.
4)реакция Витали-Морена: часть сухого остатка в фарфоровой чашке обработать концентрированной азотной кислотой и выпарить досуха. Прибавить несколько капель раствора аммиака. Образуется оранжевое окрашивание (при прибавлении раствора гидрооксида натрия – красно-фиолетовое).

Количественное определение.
Метод газовой хроматографии-масс-спектрометрии.в качестве внутреннего стандарта – папаверин.

По окончании исследования составляется план ХТА, который обладает юридической силой.
Список литературы:
. Вергейчик Т.Х. Токсикологическая химия. – М: «МЕДпресс-информ», 2009. – 400 с.
Плетнева Т.В., Соломатин Е.М., Сыроешкин А.В. и др. Токсикологическая химия / Под ред. Т.В. Плетневой – М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2005. – 512 с.
Крамаренко В.Ф. Химико-токсикологический анализ (практикум). – Киев: “Вища школа”, 1982. – 272 с.
Фармацевтическая химия / Под ред. А.П. Арзамасцева – М.: ГЭОТАР-Медиа», 2004. – 640 с.
Катаев С.С. Крылова Е.А. Количественное определение стрихнина в крови и моче методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором. Судебно-медицинская экспертиза. — 2010 — №6. — С. 35-38.

Какие катионы в дробном методе анализа определяется в виде дитизонатов